細胞分離液是一種被廣泛應用于細胞實驗室中的化學試劑,其主要作用是將混雜在樣本中的不同種類細胞進行分離。細胞分離液通常包含離子與非離子兩種類型,離子類型根據(jù)離子的種類不同,也有多種表現(xiàn)形式。它可以通過其與目標細胞之間的特定生物化學反應分離出目標細胞。對于離子型和非離子型細胞分離液,其分別利用了不同的原理來實現(xiàn)細胞的分離。 離子型細胞分離液通常采用陽離子或陰離子聚合物、負電荷基團等化學物質(zhì)作為分離成分,通過與細胞膜表面的胞糖、磷脂、糖蛋白等生物大分子產(chǎn)生吸引作用,使得特定種類的細胞能夠黏附并固定在培養(yǎng)皿或者其他處理好的載體上。對于對應細胞,還可以通過改變反離子的濃度、PH值和溫度等參數(shù),從而加速或者減弱對細胞表面物質(zhì)的吸引作用,以達到不同程度的分離效果。
非離子型細胞分離液通常采用聚合物(如PEG)作為主要分離成分,其原理是利用該聚合物與水之間的親疏性來進行分離。具體來說,聚合物的結構中含有兩種相對較強的化學成分:親水基團和疏水基團。當聚合物被溶于水中時,親水基團會盡量與周圍的水分子結合形成氫鍵。而其中的疏水基團則會盡可能的脫水,使得聚合物在水中形成大塊狀物,在此過程中會包裹住懸浮在水中的細胞。由于不同種類的細胞表面性質(zhì)不同,所以與聚合物的親疏性也不同,因此可以通過調(diào)整聚合物濃度和處理時間等條件以實現(xiàn)不同細胞類型的分離。
細胞分離液的分類:
密度梯度離心分離法:該種方法使用高濃度的硅膠或者聚乙二醇等物質(zhì)在離心過程中形成密度梯度,在不同密度區(qū)域中有效地分離出不同類型細胞。
磁性免疫分離:通過將靶向抗體與磁珠等物質(zhì)結合,利用磁性力將目標細胞從混合物中捕獲,主要應用于CD4+、CD8+T細胞、B細胞等樣本的純化。
接觸親和分離:同時含有陽離子和陰離子的“接觸光固化”保護膜與目標細胞表面存在相互吸引作用,以實現(xiàn)動態(tài)監(jiān)測和細胞的分離純化。